Tartalom
A Gram-folt, vagy egyszerűen a Gram egy gyors és egyszerű technika, amelynek célja a baktériumok megkülönböztetése sejtfaluk jellemzői szerint, miután különböző festékekkel és oldatokkal érintkeztek.
Így Gram-festéssel ellenőrizhető a baktériumok alakja mellett a megszerzett színük is, és ez az eredmény fontos a baktériumfajok azonosításának egyéb stratégiáinak meghatározásához és ahhoz, hogy az orvos a megelőző kezelést jelezze a mikroszkóposan megfigyelt jellemzők.
A grammfestést általában rutinszerűen végezzük a laboratóriumban, és ez a bakterioszkópos vizsgálat része. Értse meg, mi a bakterioszkópia és hogyan történik.
Hogyan készül a Gram-folt
A Gram-folt egy gyors, praktikus és olcsó módszer a fertőzésekért felelős baktériumok azonosítására, hasznos az orvosok számára, hogy jelezzék a fertőzés megelőző kezelését, amely előfordulhat, mivel ezen baktériumcsoportok sajátos jellemzői ismertek,
A gramm festést 7 fő lépésben végezzük, azonban a protokoll a laboratóriumtól függően változhat:
- Helyezzen a baktérium néhány kolóniáját a tárgylemezre, és adjon hozzá egy csepp vizet a telepek homogenizálásának megkönnyítése érdekében;
- Hagyja kissé megszáradni, és a penge gyorsan áthaladhat a lángon a szárítás elősegítése érdekében, azonban fontos figyelni a hőmérsékletre, mivel ha túl magas a hőmérséklet, akkor előfordulhat, hogy megváltozik a baktériumok szerkezete, ami zavarhatja az eredményt a vizsga;
- Amikor a tárgylemez megszáradt, fedje le az ibolya kristályfestékkel, és hagyja kb. 1 percig hatni;
- Mossa meg a tárgylemezt folyó vízfolyással, és fedje le a tárgylemezt lugollal, amelynek célja a kék festék rögzítése, és hagyja 1 percig hatni. Mindkét baktériumtípus képes elnyelni a festék és a lugol által képzett komplexet, kékre váltva;
- Ezután mossa le a tárgylemezt folyó vízzel, és alkalmazzon 95% alkoholt, hagyva 30 másodpercig hatni. Az alkohol felelős a gram-negatív baktériumokat képző lipidmembrán feloldásáért, és így a festék és a lugol között képződött komplex eltávolításáért, és elszíneződik ezekből a baktériumokból. Gram-pozitív baktériumok esetében azonban az alkohol dehidratálja a gram-pozitív baktériumok sejtfalát, ami a pórusok összehúzódását és áthatolatlanságát eredményezi;
- Ezután mossa meg ismét folyó vízben, és fedje le a tárgylemezt a második festékkel, fukszinnal vagy szafraninnal, és hagyja 30 másodpercig hatni;
- Ezután mossa le a tárgylemezt folyó víz alatt, és hagyja szobahőmérsékleten megszáradni.
Amint a tárgylemez megszárad, lehetőség van egy csepp merülőolaj elhelyezésére, és a tárgylemez 100-szoros objektívvel történő megfigyelésével a mikroszkóp alatt, ellenőrizve a baktériumok jelenlétét vagy hiányát, valamint az élesztők és a hámsejtek jelenlétét.
Mire való
A gramfestés fő célja a baktériumok megkülönböztetése a sejtfal jellemzői és az általános morfológia szerint. Így a mikroszkóp alatt megfigyelt jellemzők szerint a baktériumok a következőkbe sorolhatók:
- Gram-pozitív baktériumok, amelyeket kék színnel vizualizálnak, mivel az alkohol nem színezi őket, mivel vastagabb a sejtfaluk, és pórusaik szűkülnek, ha lugolnak vannak kitéve;
- Gram-negatív baktériumok, amelyeket rózsaszín / lila színnel vizualizálnak, mivel az alkohol elszíneződik, és a szafranin vagy a fukszin megfesti őket.
A baktériumok mikroszkóp alatt történő megtekintését követően lehetséges, hogy a laboratóriumban további vizsgálatokat végeznek a baktérium fajainak azonosítására. A Gram és az adott személy által bemutatott jelekkel és tünetekkel való összefüggés révén azonban az orvos megelőző kezelést jelezhet, amíg a specifikusabb vizsgálatok eredménye nem elérhető, mivel így csökkenthető a baktériumok replikációs sebessége és megelőzhetők a szövődmények.